人外周血淋巴細(xì)胞分離液仔細(xì)的分析
更新時(shí)間：2016-08-23 點(diǎn)擊：1409
本文提供核心的知識(shí).仔細(xì),細(xì)心.人外周血淋巴細(xì)胞分離液使用說明,以下的操作步驟是zui初由Böyum.設(shè)計(jì)的程序的眾多改良版本中的一種。此程序的改良是通過運(yùn)用除去血液中的纖維蛋白或抗凝血?jiǎng)┨幚砣梭w血液；這種改良對(duì)于其他物種來源血液或者其他組織非常有必要。輕輕顛倒瓶子使LSM充分混合,無菌轉(zhuǎn)移3 mlLSM到15 ml離心管中。混合2 ml除纖維蛋白血液或肝素處理血液和2ml生理鹽水.仔細(xì)的將稀釋血液加入3 mlLSM（室溫）于15ml離心管中，在血液和LSM中形成一個(gè)明顯的分層。不要將稀釋血液混合入LSM中。室溫下400g離心15-30分鐘，離心可以沉淀紅細(xì)胞和多核白細(xì)胞同時(shí)可以再LSM上形成一層單核淋巴細(xì)胞，如上圖所示。吸出淋巴細(xì)胞上方2-3mm的血漿。吸取淋巴細(xì)胞層以及它下面一半的LSM和轉(zhuǎn)移到另外的一個(gè)離心管。加入等體積的平衡鹽緩沖液至淋巴細(xì)胞離心管中，室溫離心10分鐘，離心速度設(shè)定在既不損傷細(xì)胞又能沉淀細(xì)胞即刻，例如160 - 260 x g（去除LSM和降低血小板的百分比）。
人外周血淋巴細(xì)胞分離液程序原理：除去血液中的纖維蛋白或肝素處理血液以1：1的比例用生理鹽水或平衡鹽溶液稀釋，在分離溶液中分層，低速離心30分鐘。通過離心，遷移能力不同zui終形成不同的細(xì)胞層。大部分的紅細(xì)胞和粒細(xì)胞通過梯度遷移形成顆粒狀。由于其密度不同，淋巴細(xì)胞和其他單個(gè)核細(xì)胞（單核細(xì)胞和血小板）分布在在血漿和LSM兩層中間。淋巴細(xì)胞可以通過回抽分層回收，在進(jìn)一步去除血小板，LSM和血漿。更多相關(guān)知識(shí),請(qǐng)咨詢本公司.
