两个人免费视频观看bd动漫-两个人看的www在线观看-两个人看的www在线-两个人看的www视频中文字幕-中文字幕在线看片成人-中文字幕在线看

技術(shù)文章/ ARTICLE

我的位置:首頁  >  技術(shù)文章  >  標(biāo)記鬼筆環(huán)肽在觀察細(xì)胞骨架時(shí)的運(yùn)用

標(biāo)記鬼筆環(huán)肽在觀察細(xì)胞骨架時(shí)的運(yùn)用

更新時(shí)間:2009-04-22      瀏覽次數(shù):6530

鬼筆環(huán)肽(phalloidin 鬼筆鵝膏素)
 

 

  從一種毒性菇類中分離的劇毒生物堿,C35H48N8O11S。無色,細(xì)針狀結(jié)晶,系從毒蕈類鬼筆鵝膏(Amanita phalloides)中得到的有毒的環(huán)狀七肽。與鵝膏蕈堿(amanitin)一起存在,毒性比鵝膏蕈堿弱,對小鼠的致死劑量是50微克,對人體也有很強(qiáng)的毒性,可引起流涎、嘔吐、便血、發(fā)紺、痙攣、肌肉攣縮,以致死亡。它同細(xì)胞松弛素B的作用相反, 只與聚合的微絲結(jié)合, 而不與肌動(dòng)蛋白單體分子結(jié)合。它同聚合的微絲結(jié)合后, 抑制了微絲的解體, 因而破壞了微絲的聚合和解聚的動(dòng)態(tài)平衡。鬼筆環(huán)肽可以與聚合的微絲結(jié)合的特殊性質(zhì)使得它具有一個(gè)頗富前景的用途:通過讓這種毒素吸附于熒光染料上面,研究人員可以研究細(xì)胞的內(nèi)部工作機(jī)制,窺視細(xì)胞如何分裂。通過這些觀察,他們可以揭開癌癥工作機(jī)制和組織生長之謎。
 

 

  美國加州大學(xué)圣克魯斯分校的兩位化學(xué)家斯科特·洛基和勞拉·舒利斯科(Laura Schuresko)利用一種稱為固體階段合成(solid-phase synthesis)的手法,制造出這種致命物質(zhì)。他們不是將幾種化學(xué)物質(zhì)放入燒瓶混合,讓它們自由飄浮,而是在化學(xué)反應(yīng)期間對其中一種化學(xué)物質(zhì)進(jìn)行適當(dāng)約束,這樣一來,研究人員在復(fù)雜的化學(xué)反應(yīng)過程中可以更好地對其進(jìn)行控制。
 

 

  


 

 

  FITC和Rhodamin等熒光物質(zhì)標(biāo)記的鬼筆環(huán)肽可特異的與真核細(xì)胞的F-acting結(jié)合,從而顯示微絲骨架在細(xì)胞中的分布。鬼筆環(huán)肽的配制:0.1mg鬼筆環(huán)肽溶于1ml無水甲醇(也可用DMSO或無水乙醇溶解)配成貯存液,可在-20度避光的條件下長期保存,工作液的濃度為5ug/ml,由貯存液加生理鹽水PBS稀釋20倍即可。
 

 

  染色程序:
 

 

  生理鹽水PBS清洗細(xì)胞2次,每次10分鐘;
 

 

  3.7%-4%的甲醛或多聚甲醛固定20分鐘,生理鹽水PBS清洗細(xì)胞2次;
 

 

  加入5ug/ml的FITC-鬼筆環(huán)肽室溫染色30-60分鐘,夏季時(shí)間可以短一些,生理鹽水PBS清洗細(xì)胞2次;
 

 

  DAPI或hoechst33258染細(xì)胞核10分鐘,生理鹽水PBS清洗細(xì)胞2次;
 

 

  吸去多余水分,加熒光封片液(中性或偏堿性緩沖液加等量甘油),蓋上蓋玻片,熒光或共聚焦顯微鏡下觀察。
 

 

  注意事項(xiàng):
 

 

  鬼筆環(huán)肽的分子量小,很容易通過細(xì)胞,不需要對細(xì)胞進(jìn)行冷丙酮和TRITON X-100處理。
 

 

  藥品價(jià)格昂貴,0.1mg的售價(jià)接近兩千元,要節(jié)約使用。
 

 

  毒性較大,戴上手套操作。
 

主站蜘蛛池模板: 四虎永久在线精品波多野结衣 | 日韩久久精品一区二区三区 | 国产不卡免费 | 四虎最新入口 | 一级欧美一级日韩 | 久久99精品国产99久久 | 99福利网| 四虎永久在线精品影院 | 亚洲色图 在线视频 | 69视频免费在线观看 | 欧美.亚洲.日本一区二区三区 | 97精品在线观看 | 亚洲视频在线观看网址 | 国产免费播放一区二区 | 亚洲一区二区欧美 | 日本韩国在线 | 欧美资源在线观看 | 国产三级视频网站 | 色视在线| 玖玖精品在线观看 | 国产精品精品视频 | 日韩区在线观看 | 色吧首页dvd| 久久这里只有精品久久 | 好爽好深好猛好舒服视频上 | 亚洲国产精品久久久久久网站 | 欧美成人全部费免网站 | 国产资源站 | 国产卡一卡二卡3卡4卡无卡视频 | 国产成人在线观看免费网站 | 成年色黄大色黄大片 视频 成年日韩片av在线网站 | 555夜色555亚洲夜色 | 国产三级精品三级在线专区91 | 欧美高清日本三级人妇 | 欧美日韩精品一区二区在线线 | 天堂网2020 | 国产剧情毛片 | aaa国产一级毛片 | 成人欧美视频免费看黄黄 | 99香蕉国产线观看免费 | 国产在线精品一区二区夜色 |