蘇木色精染液配制方法
更新時(shí)間：2009-04-08 6370
李文 張賽霞
| 蘇木素是組織切片zui常用的細(xì)胞核染料，H．E染色中配方甚多，染色效果也有差異，影響染色的因素頗多，未經(jīng)氧化的蘇木素?zé)o染色能力，氧化后的蘇木素要使細(xì)胞核染色鮮藍(lán)，還要借助媒染劑的作用，蘇木素、氧化劑、媒染劑三者的搭配比例及染液的使用期限與染色效果都有著直接的關(guān)系。如何優(yōu)化三者的比例和判斷染液的有效期，使蘇木素染色達(dá)到*效果，為此我們進(jìn)行了以下探討。
1方法與結(jié)果
1.1Ehrlich蘇木素染液這是一種自然氧化成熟的蘇木素染液，比較合理的配方是：蘇木素5g，無(wú)水乙醇200ml，硫酸鋁鉀20g，甘油200ml，蒸餾水100ml，冰醋酸20ml。按此方配好的蘇木素染液盛人玻璃瓶?jī)?nèi)，瓶口蓋上數(shù)層紗布，放在有陽(yáng)光照射的臺(tái)面上，六周后成熟。此種蘇木素染液經(jīng)久耐用，細(xì)胞核染成深藍(lán)色，不易褪色，我室在1958年制作的組織切片至今仍在使用。未見(jiàn)褪色。Ehrlich蘇木素溶液是我室常備染液，每年夏季配置一次，使用一年即換新液。
1.2Harris蘇木素染液是一種添加氧化劑，使蘇木素快速成熟的染液，比較合理的配方是：蘇木素3g，無(wú)水乙醇20ml，硫酸鋁鉀20g，氧化汞1g，蒸餾水500ml，冰醋酸20ml。此染液配置好后一周至三個(gè)月內(nèi)使用，染色效果，不能久存，細(xì)胞核染呈紫藍(lán)色。
1．3Carazzi蘇木素染液這是近年來(lái)，我室使用較多的一種蘇木素染液，用碘酸鈉代替氧化汞作為氧化劑，使蘇木素快速成熟，安全可靠，節(jié)約染料，染色效果優(yōu)于前二種染液，比較合理的配方是，蘇木素1．5g，無(wú)水乙醇5ml，硫酸鋁鉀20g，碘酸鈉0．2g，蒸餾水400ml，甘油100ml。制備方法是；蘇木素用5ml無(wú)水乙醇溶解，蒸餾水溶解鉀明礬（加溫至90度，勿煮沸），將溶解的蘇木素和碘酸鈉同時(shí)加人鉀明礬水溶液內(nèi)，流水冷卻至室溫，再加甘油，震蕩1小時(shí)后即可使用，染液可保用6個(gè)月。細(xì)胞核染呈鮮藍(lán)色，與伊紅對(duì)比鮮明亮麗，特別對(duì)于脫鈣骨和長(zhǎng)時(shí)間甲醛固定的組織染色效果同樣滿意。
2討論
2．1經(jīng)過(guò)我們多年的實(shí)踐，不斷探索認(rèn)為，上述三種蘇木素染液的配方比例較為合理，既不會(huì)使蘇木素過(guò)度氧化，給染色過(guò)程增添麻煩，也不會(huì)浪費(fèi)試劑，而使蘇木素的染色達(dá)到*效果。
2．2配制蘇木素染液所用的氧化劑、媒染劑用分析純（AR），純度高、雜質(zhì)少，才能保證蘇木素的染色效果。
2．3新配方與原配方比較，主要是蘇木素和硫酸鋁鉀的份量稍有增減，這并不影響兩者結(jié)合后所形成的色精。是否改變?nèi)疽旱腜H值，有待進(jìn)一步探討。我們認(rèn)為過(guò)量的硫酸鋁鉀不但造成試劑的浪費(fèi)，且容易使染液產(chǎn)生沉淀物。
2．4蘇木素從配制→成熟→失效，有一個(gè)過(guò)程，如何判斷其是否成熟、何時(shí)失效?現(xiàn)介紹一個(gè)簡(jiǎn)便的方法供參考：取一滴蘇木素染液，滴入一杯自來(lái)水中，如果沉在水底不散開(kāi)，且呈紅色，是未成熟的；如果很快散開(kāi)，且呈紫藍(lán)色，為成熟，此時(shí)染色效果，如果呈藍(lán)色，表示染液失效。 |
